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化妝品中富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，包括醇類，胺類，脂肪，蛋白質(zhì)，氨基酸，維生素，水等。不僅能夠提供微生物生長(zhǎng)所需的豐富的碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)成分,并利于微生物的生長(zhǎng)和繁衍?；瘖y品被微生物污染化妝品后 會(huì)影響化妝品的品質(zhì), 可能導(dǎo)致外觀色澤、氣味的改變, 乳化體系、失去功效等; 另外化妝品因被微生物污染而變質(zhì)會(huì)對(duì)消費(fèi)者的健康造成危害, 表現(xiàn)為對(duì)皮膚的刺激，以及引起疾病。微生物的特點(diǎn)是種類多，繁殖速度快，分布廣泛并容易變異。由于微生物這些特點(diǎn)，因此它存在于我們生活中的每一個(gè)角落，也導(dǎo)致了化妝品微生物的污染是多種多樣的，為化妝品的生產(chǎn)和保存帶來(lái)了困難?；瘖y品微生物的污染源可能在消費(fèi)者使用過(guò)程中帶來(lái)的污染，也可能源于化妝品原料，產(chǎn)品包裝以及生產(chǎn)設(shè)備上的殘留物。為避免化妝品受到微生物污染，目前主要的方法是在產(chǎn)品中添加適量的防腐劑，以抵御微生物的一次污染或多次污染。通過(guò)防腐功效測(cè)試實(shí)驗(yàn)對(duì)防腐效能進(jìn)行有效的評(píng)估，以判斷防腐體系是否足夠耐受微生物的污染。

       目前國(guó)內(nèi)外使用較多的防腐功效測(cè)試實(shí)驗(yàn)，即微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)，主要有：美國(guó)藥典(USP)、美國(guó)檢驗(yàn)方法及材料協(xié)會(huì)(ASTM E-640)、盥洗用品和香料協(xié)會(huì)(CTFA)、歐洲藥典(EP)、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO 11930-2012)等推薦的方法。微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn)的基本原理是在化妝品中加入一定量的微生物，定期檢測(cè)微生物生長(zhǎng)情況，以此判斷防腐劑的防腐效能。不同的國(guó)家、不同的組織采用的測(cè)試菌種、接種方式和接種次數(shù)、接種濃度和接種量、檢測(cè)周期和評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)等都有所差異。

一、防腐功效實(shí)驗(yàn)選用的測(cè)試菌種

防腐功效實(shí)驗(yàn)中，菌種的選擇非常重要，選擇原則一般應(yīng)包括革蘭氏陽(yáng)性菌，革蘭氏陰性菌，酵母菌，霉菌，這幾類微生物中每類至少選一種。或者還可以選擇產(chǎn)品生產(chǎn)、包裝、儲(chǔ)存和使用過(guò)程中有可能污染的微生物，這些污染的微生物能反映實(shí)際環(huán)境的污染狀況，加入到防腐功效測(cè)試，一定程度上能更加有效的評(píng)價(jià)防腐體系的抑菌性能。

二、接種方式和接種次數(shù)

在測(cè)試產(chǎn)品中加入特定的微生物的方式分為兩種：1.混合培養(yǎng)法;2純培養(yǎng)法(單一培養(yǎng)物)。混合培養(yǎng)法的優(yōu)勢(shì)是比較便捷，工作量小，通過(guò)一次挑戰(zhàn)測(cè)試就能完成幾種菌株的測(cè)試，模擬實(shí)際環(huán)境中微生物的特點(diǎn)，但混合培養(yǎng)法是不能有針對(duì)性的測(cè)試對(duì)每一種菌種的抑制效果。純培養(yǎng)法的優(yōu)點(diǎn)是能夠有針對(duì)性的測(cè)試防腐體系對(duì)每種測(cè)試菌種的抑制效果，更全面的評(píng)估防腐體系，缺點(diǎn)是一份試樣僅測(cè)試一種菌，工作量較大，測(cè)試情況不能完全模擬自然環(huán)境。接種次數(shù)主要是一次加菌，但特殊情況可多次加菌。一次加菌較適用于一次性使用產(chǎn)品，多次加菌較適用于容易被消費(fèi)者反復(fù)接觸而污染的產(chǎn)品，而且多次加菌對(duì)防腐體系的抑菌能力要求更為嚴(yán)格，一定程度上需要增加防腐體系的用量。以下是5種防腐功效測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)中推薦的接種方式和接種次數(shù)：

三、接種濃度和接種量

測(cè)試菌種用每種特定微生物最適的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，用無(wú)菌生理鹽水分散和轉(zhuǎn)移菌種(黑曲霉用無(wú)菌生理鹽水和吐溫80混合液來(lái)分散和轉(zhuǎn)移)，再用無(wú)菌生理鹽水(無(wú)菌生理鹽水和吐溫80混合液)稀釋至特定濃度后，用于測(cè)試樣品的加菌。細(xì)菌培養(yǎng)基推薦：胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)或大豆酪蛋白消化瓊脂培養(yǎng)基;真菌培養(yǎng)基推薦：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)。5種防腐功效測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)方法中微生物接種濃度的數(shù)量級(jí)范圍基本一致。具體如下表所示：

菌懸液配制時(shí)，可以通過(guò)與麥?zhǔn)媳葷岱ㄖ械谋葷峁鼙葘?duì)，可以通過(guò)紫外分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，可以使用血細(xì)胞儀或其他可重復(fù)的直接顯微鏡計(jì)數(shù)技術(shù)來(lái)初步確定菌懸液的濃度。最后，通過(guò)平板稀釋法，將菌懸液梯度稀釋后，平板計(jì)數(shù)確定菌懸液濃度值。

四、檢測(cè)周期

檢測(cè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)的選擇，基本是7天，14天，28天，部分標(biāo)準(zhǔn)中，會(huì)針對(duì)特殊劑型產(chǎn)品增加檢測(cè)節(jié)點(diǎn)。

以上是化妝品防腐效能試驗(yàn)方法簡(jiǎn)單介紹，需要了解化妝品防腐效能試驗(yàn)方法更詳細(xì)的內(nèi)容可以聯(lián)系簡(jiǎn)愷生物的技術(shù)客服。簡(jiǎn)愷生物實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法成熟，經(jīng)驗(yàn)豐富。簡(jiǎn)愷生物對(duì)每個(gè)產(chǎn)品都進(jìn)行防腐挑戰(zhàn)試驗(yàn)并符合《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》(2015版)的規(guī)定。